Технические характеристики ВАЗ 2112
Описание автомобиля ВАЗ 2112
Запуск в серию хэтчбека ВАЗ 2112 состоялся в 1997 году, автомобиль имеет трех и 4-дверное исполнение, в 2009 году он был снят с производства. Среди всего модельного ряда транспортных средств выпускаемых на то момент АвтоВАЗом этот автомобиль имел наилучшие динамические характеристики. За счет более короткого, чему у «десятки» корпуса машина демонстрирует лучшую управляемость, способна на довольно высоких скоростях входить в крутые повороты без риска опрокидывания. Благодаря закругленным боковым поверхностям корпуса в салоне образовалось больший запас свободного места в области плеч. Отделка внутреннего пространства осуществлена тканевыми материалами с цветными вставками, Компоновка оборудования на месте водителя хорошо продумана, все элементы управления, включая средства консоли, располагаются в прямой доступности от рук водителя. В городских условиях эксплуатации машина экономично расходует топливо, небольшие габаритные размеры корпуса позволяют не испытывать проблем с парковой.
Экстерьер
Дизайн кузова ВАЗ 2112 образован из закругленных обтекаемых форм, линия подоконника восходит под довольно крутым углом, боковые поверхности корпуса на уровне дверных ручек параллельно подоконнику пересекает вогнутая полоса штамповки. Возле ветрового стекла выполнены вентиляционные решетки, капот имеет 25-градусный угол наклона, на нем образована невысокая полоса штамповки. Ее контуры переходят в декоративный обвес радиаторной решетки имеющей вид пластины с выполненной на ней горизонтальной прорезью, над указанным элементом установлен фирменный логотип автопроизводителя. Передний бампер изготовлен из жесткого полимера, в его нижней части образован аэродинамический обвес, используемый под компоновку секции воздухозаборной системы.
Колесные арки слегка закрывают колеса, над порогами нанесены декоративные накладки. Над дверью багажника выполнен широкий спойлер, на нижнюю часть дверей нанесены фирменные атрибуты. Между прямоугольниками задних фонарей заходящих на боковые поверхности корпуса смонтирована светоотражающая декоративная накладка. Под задним бампером с его левой стороны выполнен вырез, в него помещена труба выхлопной системы. Габариты кузова составляют 4285/1680/1480 мм, соотношение колесной колеи – 1410/1380 мм, снаряженная/допустимая масса – 1040/1495 кг, база колес – 2492 мм. Объем багажника – 350 литров, это пространство расширяется до 650 литров.
Интерьер
Отделка внутреннего интерьера ВАЗ 2112 выполнена преимущественно из плотного тканевого материала немарких оттенков. В том числе ткань используется для драпировки поверхностей дверей, которые оборудованы компактными подлокотниками, совмещенными с дверными ручками, неглубокими карманами и штатными местами, предназначенными для монтажа динамиков автозвука. Задний диван предоставляет комфортабельные посадочные места, разделенные невысокими, упругими валиками, за спинкой дивана присутствует легкая багажная полка. В случае необходимости ее можно быстро снять и использовать в качестве напольного покрытия при расширении объема багажного отсека. Между передними креслами помещена полимерная площадка, на ней установлен селектор трансмиссии, за ним располагается рукоятка стояночного тормоза. Дизайн передней панели образован из закругленных форум, консоль слегка развернута в сторону водителя, ее поверхность занимают регулируемые решетки воздуховодов, переключатели и кнопки управления функциями климатического оборудования. Ниже указанных элементов оставлена пара монтажных мест предназначенных для установки дополнительного оборудования. Крупные клавиши включения сервисных систем вынесены на боковые поверхности приборного щитка, в состав щитка вошел стандартный комплект приборов контроля.
Технические характеристики
В начальном исполнении под капотом ВАЗ 2112 устанавливается мотор с рабочим объемом 1596 см3. Его мощность составляет 89 л. сил, предельный крутящий момент – 131 Нм, максимальная скорость – 180 км/час, усредненный уровень потребления топлива – 7,5 литров. Наиболее продвинутая версия машины комплектуется агрегатом объемом 1796 см3. Его мощность составляет 120 л. сил, при 5800 об/минуту крутящий момент составляет 162 Нм, время разгона – 10 секунд, предельная скорость – 200 км/час, расход топлива в смешанном цикле эксплуатации – 8,5 литров.
Оптовый центр продаж запчастей в Люберцах (Восток) | г. Люберцы, ул. Мира, д. 8-Б | +7 (495) 660-51-64 |
Оптовый центр продаж запчастей Машково (Логистический центр) | г. Люберцы, д. Машково, Машковский пр-д, д.11 стр.2 | +7 (495) 660-51-64 (доб. 7576 или 7585) [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Новогиреево | г. Москва, ул. Кетчерская, д. 2а | +7 (495) 664-23-36 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Варшавском шоссе (Юг) | г. Москва, 33 км. МКАД, Варшавское шоссе, д. 170 ‘Г’ | +7 (495) 660-07-29 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Дмитровском шоссе (Север) | г. Москва, 82 км. МКАД, Дмитровское шоссе, д. 163, стр. 6 | +7 (495) 660-24-53 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Рябиновой | г. Москва, ул. Рябиновая, владение 63Г | +7 (495) 668-06-97 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Ярославском шоссе (север) | г. Королев, Ярославский проезд, д. 19 | +7 (495) 780-05-06 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Хабаровской | г. Москва, Хабаровская улица, д. 2 | +7 (495) 108-27-23 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей на Новорижском шоссе (Северо-Запад) | МО, Красногорский район, д. Гольево, ОАО «МОИС-1» | +7 (495) 668-09-60 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Екатеринбурге | г. Екатеринбург, ул. Монтажников, д. 24/1 | +7 (343) 384-56-25 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Нижнем Новгороде | г. Нижний Новгород, Московское шоссе, д. 137Б | +7 (831) 411-11-28 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Новосибирске | г. Новосибирск, Кировский район, ул. Петухова, дом 69В | +7 (383) 322-70-45 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Уфе (Нефтекамск) | 452683, Республика Башкортостан, г. Нефтекамск, ул. Монтажная, д. 8 | +7 (34783) 35-7-42 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Перми | г. Пермь, ул. Рязанская, д. 105, корп. 1 | +7 (342) 207-61-84 [email protected] |
Оптовый центр продаж запчастей в Сабурово | г. Москва, Каширское шоссе, д. 53, к. 1 | +7 (495) 668-07-92 [email protected] |
Размеры дворников на Lada [ВАЗ] 2110/2111/2112
Подобрать дворники на Lada [ВАЗ] 2110/2111/2112
1 VAZ- Укажите марку…
- Acura
- Alfa Romeo
- Aston Martin
- Audi
- Bentley
- BMW
- Byd
- Cadillac
- Chery
- Chevrolet
- Chrysler
- Citroen
- Daewoo
- Daihatsu
- Datsun
- Dodge
- Faw
- Ferrari
- Fiat
- Ford
- Geely
- GMC
- Great Wall
- Haval
- Honda
- Hummer
- Hyundai
- Infiniti
- Iran Khodro
- Isuzu
- Iveco
- Jaguar
- Jeep
- Kia
- Lada [ВАЗ]
- Lancia
- Land Rover
- Ldv
- Lexus
- Lifan
- Lincoln
- Maserati
- Maybach
- Mazda
- Mercedes-Benz
- Mercury
- MG
- Mini
- Mitsubishi
- Nissan
- Opel
- Peugeot
- Pontiac
- Porsche
- Renault
- Rolls-Royce
- Rover
- Saab
- Seat
- Skoda
- Smart
- Ssangyong
- Subaru
- Suzuki
- Toyota
- Volkswagen
- Volvo
- Vortex
- ГАЗ
- ЗАЗ
- Тагаз
- УАЗ
- Укажите модель…
- 2101-2107
- 2108/2109/21099
- 2110/2111/2112
- 2113/2114/2115
- Granta
- Kalina
- Kalina Hatchback
- Kalina Kombi
- Largus
- Niva
- Priora
- Vesta
- XRAY
Шины и диски на Lada 2110/2111/2112
я хочу Подобрать
- Шины
- Диски
- По авто
- Масла, тех. жидкости
Ширина —44,555,566,577,588,599,51010,5x
Диаметр —1213141516171819202122
Вылет —-1-10-15-19-20-40-51101051061516182202223242526272829303131,532333435363737,5383939,544040,7541424343,54445464747,54848,54949,5550515252,55354555656,457585960626668
PCD —3x983x2564x984x1004x1084x1144x114,34x2255x1005x1055x1085x1105x1125x114,35x1155x1185x1205x1275x1305x139,75x1505x1606x114,36x1276x1306x139,76×170
Бренд ЛюбойAlcastaJ&L RACINGNitroReplicaSharkSlikTreblYamato JapanYamato SamuraiYokattaН.Новгород (ГАЗ)ТЗСКK&KTech LineIFreeSkadКременчугRPLC-liteAeroYamato Segun
Наличие от 4 штук
НайтиПроизводитель Выберите производителяAcuraAlfa RomeoAston MartinAudiBentleyBMWBrillianceBuickCadillacChanganCheryChevroletChryslerCitroenDaewooDaihatsuDatsunDodgeDongfengEmgrandFAWFerrariFiatFordGeelyGMCGreat WallHafeiHaimaHondaHummerHyundaiInfinitiIsuzuIvecoJaguarJeepKiaLadaLanciaLand RoverLexusLifanLincolnLotusMaseratiMaybachMazdaMercedesMercuryMGMiniMitsubishiNissanOpelPeugeotPontiacPorscheRenaultRolls RoyceRoverSaabSaturnScionSeatSkodaSmartSsang YongSubaruSuzukiTeslaToyotaVolkswagenVolvoZAZГАЗТаГАЗУАЗ
Модель —
Год выпуска —
Модификация —
НайтиПроизводитель Выберите производителяCastrolElfEneosFordGMGT OilIdemitsuKixxLuxeMannolMazdaMobilMotulNesteNissanShell HelixTOTACHITotalToyotaWOLFЛукойлРоснефтьТНК
Тип Выберите типМинеральноеПолусинтетическоеСинтетическое
Применяемость Выберите применяемостьАКПП/ГУРМоторноеПромывочноеТрансмиссионное
Вязкость SAE Выберите SAE0W-200W-300W-4010W-3010W-4010W-6015W-405W-205W-305W-405W-5075W-8075W-90
Тип двигателя Выберите тип двигателяБензиновыйБензиновый/ДизельныйГазовыйДизельный
Объем упаковки Выберите объем1л200л208л20л2л3,5л4л5л60л
НайтиШины, диски на Лада (ВАЗ) 2110 (LADA (ВАЗ) 2110)
LADA 2110 представляет собой серию автомобилей, которые выпускались с 1995 по 2009 год на автомобильном заводе ВАЗ. Наиболее популярная машина семейства — ВАЗ 2110. Опытные модели были выпущены в 1995 году, а серийное производство стартовало в 1996 году.
Какие типоразмеры шин и дисков для автомобиля Лада (ВАЗ) 2110 рекомендует компания KOLOBOX?
Для того, чтобы определить какие покрышки и колесные диски подходят этому транспортному средству, необходимо определить оптимальные размеры, с которыми выпускается авто, а также альтернативные варианты.
В таблице ниже представлены параметры шин (в левой части) и характеристики дисков (в правой части). В компании KOLOBOX каждый водитель машины Лада-2110 сможет получить подробную консультацию и подобрать летние и зимние покрышки, литые или штампованные диски.
2110 комплектуется колесами с диаметрами 13 и 14 дюймов. Ширина автошин варьируется от 175 до 185 мм, а профиль от 70 до 55 %. Таким образом, основные размеры: 175/70 R13, 175/65 R14, 185/60 R14. А альтернативные: 185/65 R13, 195/50 R15 и 185/55 R15.
Подбираем зимние шины для автомобиля LADA (ВАЗ) 2110
Летние покрышки отличаются от зимних особенной структурой, которая начинает затвердевать при опускании температуры до определенного уровня. Это приводит к значительному ухудшению сцепления с дорожным полотном, что в свою очередь снижает безопасность и комфорт во время движения. Поэтому необходимо своевременно обращаться за заменой комплектов автошин.
Несколько моделей покрышек на зиму:
Зимние шины для Лада (ВАЗ) 2110 | Kumho KW7400 Maxxis NP3 Arctic Trekker Kama Kama-505 Ирбис Contyre Arctic Ice Kama Kama-519 Euro Cordiant Winter Drive |
---|
Подбираем летнюю резину для автомобиля Лада (ВАЗ) 2110
Многие обладатели авто Лада 2110 обращают свое внимание на низкопрофильные покрышки. Прежде чем решить установить их на машину, стоит узнать их “плюсы” и “минусы”. К положительным сторонам автошин с низким профилем относятся:
- Увеличение маневренности во время движения.
- Повышение управляемости: колеса быстро и “остро” реагируют на любые движения руля.
К отрицательным качествам относятся:
- Узкая резина не отличается упругостью, она не поглощает поступающие от дороги вибрации, передавая их на ходовую. В результате отдельные составляющие этого узла выходят из строя значительно раньше.
- Снижение комфорта из-за повышения шума.
- Недостатки дорожного покрытия в виде небольших камней или выбоин могут привести к пробиванию автомобильной резины. Происходит это намного легче, чем с высокой покрышкой.
Несколько вариантов покрышек на лето:
Летние шины для Лада (ВАЗ) 2110 | Kama Kama-205 Amtel Planet Kama Kama-217 Kama Breeze-132 Tunga Zodiak2 Amtel Planet DC |
---|
Выбираем диски для авто LADA (ВАЗ) 2110
Лада 2112 имеет следующие характеристики колесных дисков:
- Ширина 5 дюймов (при этом максимально допустимая ширина — 5,5 дюймов).
- Диаметр колесного обода 13 и 14 дюймов.
- Разболтовка 4*98, т.е. четыре крепежных отверстия находятся на окружности, диаметр которой 98 мм.
- Вылет диска ЕТ 35-40.
- Диаметр отверстия под ступицу равен 58,6 мм.
Какое давление необходимо поддерживать в покрышках автомобиля Лада (ВАЗ) 2110?
Для 13-ти дюймовых покрышек рекомендуемое давление воздуха находится на отметке 1,9 бар, а для 14-ти дюймовых — 2,0 бар. Наиболее популярное у автолюбителей значение — два бара.
В вопросе контроля и поддержания давление важно не допускать чрезмерное увеличение или уменьшение давления, т.к. это чревато потерей комфорта и снижением износостойкости автомобильной резины.
Как размер шин и дисков влияет на характеристики авто?
Фото ВАЗ 2112 | |
Модель, завершающая «десятое» семейство, выпускается с 2000 года. Кузов пятидверный хэтчбек (комби), автомобиль сочетает в себе все конструктивные особенности и «начинку» ВАЗ 2110, и заднее сиденье универсала 2111. Шестнадцатиклапанный двигатель и 14-ти дюймовые колеса предусмотрены для базовой комплектации. Эта машина короче седана и универсала почти на десять сантиметров. Благодаря этому у нее более четкие реакции на поворот рулевого колеса. У «двенадцатой» свой, более спортивный характер управляемости, однако эта машина по комфорту здорово отличается в лучшую сторону от «девятки» с аналогичным типом кузова. Наряду с базовой моделью 2112 выпускается более дешевая версия 21122 с восьмиклапанным мотором и 13-ти дюймовыми шинами. | |
Характеристика ВАЗ 2112 | |
Автомобиль ВАЗ | 2112 |
Год начала выпуска | 2000 |
Выпуск | серийно |
Кузов | |
Тип кузова | хэтчбек |
Число мест | 5 |
Число дверей | 5 |
Габариты | |
Длина, мм | 4170 |
Ширина, мм | 1680 |
Высота, мм | 1435 |
Колесная база, мм | 2492 |
Колея колес спереди, мм | 1400 |
Колея колес сзади, мм | 1370 |
Дорожный просвет, мм | 165 |
Шины | 175/65 R14 |
Снаряженная масса, кг | 1010 |
Полная масса, кг | 1485 |
Полезная нагрузка, кг | 475 |
Объем багажника, л | 400 |
Объем топливного бака, л | 43 |
Двигатель | |
Модель двигателя | 2112 |
Тип двигателя | L4 |
Объем двигателя, см³ | 1500 |
Мощность, л.с./об.мин | 92/5600 |
Крутящий момент, Н·м/об.мин | 130/3600 |
Наддув | — |
Клапанов на цилиндр | 4 |
Расположение клапанов и распределительного вала | верхнеклапанный с верхним расположением распределительного вала |
Компоновка двигателя | спереди, поперечно |
Система питания | распределенный впрыск топлива |
Скорость | |
Максимальная скорость, км/ч | 185 |
Разгон до 100 км/ч, с | 12,5 |
Топливо | |
Марка топлива | бензин 95 |
Расход, л/100 км | 8,8 |
Привод | |
Тип привода | передний |
КПП | |
Механическая | 5 |
Автоматическая | — |
Подвеска | |
Передняя | независимая типа Макферсон |
Задняя | продольный рычаг |
Тормоза | |
Передние | дисковые |
Задние | барабанные |
Комплект шумоизоляции на автомобиль ВАЗ 2112 Двенадцатая
масса комплекта 12кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
масса комплекта 65,2кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
масса комплекта 16кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
масса комплекта 66,5кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
масса комплекта 13,7кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
масса комплекта 53,9кг; подробную инструкцию по установке данного комплекта можно прочитать
Какой комплект для проклейки автомобиля выбрать:
Во всех расчетах Вашему вниманию представлено три комплекта для проклейки всего автомобиля: максимальный эффект, средний эффект и минимальный эффект. Названия сами говорят за себя, и, понятно, какой комплект лучше, более эффективен, дает больший результат. Но, чем эффективнее комплект, тем он и дороже. В итоге, золотую середину между ценой и эффективностью выбирать Вам.
Также под названием каждого комплекта указан его вес, зная которой, возможно, Вы сделаете выбор в сторону того или иного комплекта. Материалы во всех комплектах подобраны с запасом в 15%, поэтому фактический вес установленных на Ваш автомобиль материалов будет ниже на 15%.
В комплектах представлены следущие материалы: вибропоглощающие, шумо-теплоизоляционные, шумопоглощающие и антискрипные. Рассмотрим отличия комплектов между собой по отличиям материалов, которые в них входят.
Начнем с вибропоглощающих материалов. В комплект с максимальным эффектом входит «Вибролист СУПЕРЛЕГКИЙ X-mat RED 2мм», со средним эффектом — «Вибролист Викар Premium 2мм», с минимальным эффектом — «Вибролист Викар Light 2мм». Вибролист СУПЕРЛЕГКИЙ X-mat RED 2мм одинаков по эффективности с Вибролистом Викар Premium 2мм, но легче его на 30% и, к сожалению, дороже на 50%. Вибролист Викар Light 2мм отличается от Вибролиста Викар Premium 2мм тем, что имеет более тонкую фольгу толщиной 60 микрон, против 100 микрон у Premium, и стоит на 18% дешевле. В итоге, в максимальном комплекте Вы выигрываете по массе, в минимальном по цене, а в среднем комплекте получаете золотую середину.
Переходим к шумо-теплоизоляционным материалам. В комплект с максимальным эффектом входит «Шумолист X-mat SOFT 6мм и 10мм на клею», со средним эффектом — только «Шумолист X-mat SOFT 6мм на клею», с минимальным эффектом — «Изолон 4мм и 8мм». Материал Шумолист в разы эффективнее снижает шум, чем материал Изолон, но стоит также в разы дороже. В максимальном комплекте Шумолист представлен в толщине 6 и 10 мм, а в среднем только 6мм. По эффекту теплоизоляции и Шумолист, и Изолон в условиях салона автомобиля, одинаково хорошо справляются с поддержанием температуры как в летнее, так и зимнее время. В итоге, в максимальном комлекте Вы получаете самый существенный эффект шумоизоляции, в минимальном комплекте Вы экономите огромные средства, а в среднем комплекте получаете золотую середину.
Переходим к шумопоглощающим материалам. В комплект с максимальным эффектом входит «Шумопоглотитель X-mat Stels А15ЛK ламинированный на клею», со средним эффектом — «Шумопоглотитель X-mat Stels А15K на клею», с минимальным эффектом — «Антискрип X-mat Flex А15 на клею». Отметим, что и Шумопоглотитель X-mat Stels, и Антискрип X-mat Flex дополнительно выступают как теплоизолирующие и антискрипные материалы. Шумопоглотитель X-mat Stels ламинированный отличается от обычного шумопоглотителя наличием пвх-пленки, которая дополнительно защищает материал от влаги. Антискрип X-mat Flex, при той же толщине, отличается от Шумопоглотителя X-mat Stels менее мягкой структурой и меньшими влагоотталкивающими свойствами, но стоит в разы дешевле. По эффекту теплоизоляции ламинированный Шумопоглотитель X-mat Stels является лучшим. Также он совсем не впитывает влагу. По эффекту шумоизоляции оба Шумопоглотителя X-mat Stels работают одинаково. В итоге, в максимальном комплекте Вы получаете самый существенный эффект шумоизоляции, теплоизоляции, минуете впитывание влаги в материал, в минимальном комплекте Вы экономите огромные средства, а в среднем комплекте получаете золотую середину.
В заключение, антискрипные материалы. Во все комплекты входит материал «Антискрип Велюр Черный на клею», но отдельно в комплекте с максимальным эффектом входит «Шумопоглотитель X-mat Stels А15ЛK ламинированный», со средним эффектом — «Шумопоглотитель X-mat Stels А15K на клею», с минимальным эффектом — «Антискрип X-mat Flex А15 на клею» и «Шумопоглотитель X-mat Stels А7K на клею». Шумопоглотитель X-mat Stels и Антискрип X-mat Flex мы разобрали в шумопоглощающих материалах, но они являются и антискрипными материалами. А так как в комплекте с минимальным эффектом вместо Шумопоглотитель X-mat Stels стоит Антискрип X-mat Flex, то в него пришлось добавить Шумопоглотитель X-mat Stels отдельной позицией. Все комплекты одинаково хорошо справятся со скрипами в салоне автомобиля.
Сопутствующие материалы (обезжириватель, ролик, набор для демонтажа, нож, перчатки) во всех комплектах одинаковые.
По статистике, 70% покупателей выбирают комплект с максимальным эффектом, 20% со средним эффектом и лишь 10% покупателей останавливают свой выбор на комплекте с минимальным эффектом.
Если Вы решили в первый раз сделать шумку своего авто, то рекомендуем всё-таки взять комплект с максимальным эффектом и получить максимальный эффект!
Все материалы из выше перечисленных комплектов Вы можете приобрести прямо здесь:
Вибролист Викар Light толщиной 2мм есть на складе доступен аналог с листами большего размера: Викар Standart maxi 2мм КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ЛАЙТ:
АССОРТИМЕНТ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР: ОПИСАНИЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ЛАЙТ:
ВЫБОР ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Вибролист Викар Premium толщиной 2мм есть на складе доступен аналог с листами большего размера: Викар Standart maxi 2мм КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
АССОРТИМЕНТ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР: ОПИСАНИЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
ВЫБОР ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Вибролист Викар Premium толщиной 2мм есть на складе, цена снижена по акции от SHYMKA.RU доступен аналог с листами большего размера: Викар Standart maxi 2мм КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
АССОРТИМЕНТ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР: ОПИСАНИЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
ВЫБОР ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
Вибролист Викар Premium толщиной 3мм есть на складе доступен аналог с листами большего размера: Викар Standart maxi 3мм КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
АССОРТИМЕНТ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР: ОПИСАНИЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
ВЫБОР ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Вибролист Викар Premium толщиной 3мм есть на складе, цена снижена по акции от SHYMKA.RU доступен аналог с листами большего размера: Викар Standart maxi 3мм КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
АССОРТИМЕНТ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР: ОПИСАНИЕ ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР ПРЕМИУМ:
ВЫБОР ВИБРОЛИСТОВ ВИКАР:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
Вибролист X-mat СУПЕРЛЕГКИЙ RED-2 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ВИБРОЛИСТА X-MAT RED 2мм:
ОПИСАНИЕ ВИБРОИЗОЛЯЦИИ X-MAT:
ВЫБОР ВИБРОИЗОЛЯЦИИ X-MAT:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на клею 4004 СЕРЫЙ есть на складе данная позиция также представлена в рулоне данная позиция также представлена с фольгой данная позиция также представлена с герметиком КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ:
АССОРТИМЕНТ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ: ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на клею 4008 СЕРЫЙ есть на складе данная позиция также представлена в рулоне данная позиция также представлена с фольгой данная позиция также представлена с герметиком КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ:
АССОРТИМЕНТ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ: ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на клею X-mat П4 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на влагостойком клею X-mat П4В есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на влагостойком клею X-mat П4В ОРАНЖЕВЫЙ есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на клею X-mat П8 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Изолон на влагостойком клею X-mat П8В ОРАНЖЕВЫЙ есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ИЗОЛОНА X-MAT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Шумолист на клею X-mat SOFT 6 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
УКАЗАНИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ И МОНТАЖУ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Шумолист на клею X-mat SOFT 10 на складе 13 листов, приход ожидается в середине мая КРАТКИЕ ДАННЫЕ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
УКАЗАНИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ И МОНТАЖУ ШУМОЛИСТА X-MAT SOFT НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Антискрип на клею X-mat FLEX А15 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ АНТИСКРИПА X-MAT FLEX НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ АНТИСКРИПА X-MAT FLEX НА КЛЕЮ:
ОТЛИЧИЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ X-MAT ОТ АНТИСКРИПА X-MAT FLEX:
ПРИМЕНЕНИЕ АНТИСКРИПА X-MAT FLEX НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: |
|
Шумопоглотитель на клею X-mat STELS А7 есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-MAT STELS:
ОПИСАНИЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-mat Stels:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Шумопоглотитель на клею X-mat STELS А15K есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-MAT STELS:
ОПИСАНИЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-mat Stels:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Шумопоглотитель на клею X-mat STELS А15ЛK есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-MAT STELS:
ОПИСАНИЕ ШУМОПОГЛОТИТЕЛЯ НА КЛЕЮ X-mat Stels:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОКЛЕЙКИ АВТО: |
|
Антискрип Велюр на клею ЧЕРНЫЙ есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
АССОРТИМЕНТ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: |
|
Антискрип Велюр на клею ЧЕРНЫЙ есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
АССОРТИМЕНТ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
ОПИСАНИЕ АНТИСКРИПА ВЕЛЮР НА КЛЕЮ:
ПОРЯДОК УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ:
НУЖНОЕ ДЛЯ УСТАНОВКИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: НУЖНОЕ ДЛЯ ПЕРЕПРОДАЖИ АНТИСКРИПНЫХ МАТЕРИАЛОВ: |
|
Обезжириватель ХИМИК есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ ОБЕЗЖИРИВАТЕЛЯ ХИМИК:
ОПИСАНИЕ ОБЕЗЖИРИВАТЕЛЯ ХИМИК:
|
|
Нож для шумки нет на складе, приход ожидается в середине мая КРАТКИЕ ДАННЫЕ:
ОПИСАНИЕ:
|
|
Ролик прикаточный металлический диаметр 23мм есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ:
ОПИСАНИЕ:
ПРИМЕНЯЕТСЯ ДЛЯ ПРИКАТКИ СЛЕДУЮЩИХ ВИДОВ ВИБРОИЗОЛЯЦИИ: |
|
Перчатки ХБ с пвх напылением есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ:
ОПИСАНИЕ:
|
|
Набор для демонтажа есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
ОПИСАНИЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
|
|
Набор для демонтажа есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
ОПИСАНИЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
|
|
Набор для демонтажа есть на складе КРАТКИЕ ДАННЫЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
ОПИСАНИЕ НАБОРА ДЛЯ ДЕМОНТАЖА:
|
|
Philtone Guitar Company — Измерение размера ладов
Лады какого размера у этой гитары? Лады какого размера мне нужны? Лучший способ узнать это — сыграть на множестве разных гитар и отметить / измерить их размеры.
Размеры ладов могут сбивать с толку. Это небольшие размеры, но они сильно влияют на ощущение, и обозначения размеров могут отличаться. На мой взгляд, лучше думать и говорить о ладах с точки зрения их фактической ширины и высоты коронки, а не о старых числах Данлопа (создателя системы нумерации 6xxx), поскольку они могут означать разные вещи для разных людей; я.е. Warmoth перечисляет 6105 как 0,095-0,047 «, в то время как USACG имеет значение 0,090-0,055» — это два очень разных ощущения ладов.
Fretwire может отличаться от некоторых производителей, так как он формируется путем экструзии через серию роликовых штампов и штампы изнашиваются. Я наблюдал в моем магазине настоящий Dunlop 6105 с шириной от 0,088 дюйма до 0,090 дюйма и высотой от 0,052 дюйма до 0,055 дюйма. Из-за непостоянного размера и формы хвостовика я обычно не использую лады Dunlop в наши дни, вместо этого предпочитаю более точные лады Jescar немецкого производства или японские лады Stewart McDonald.И у Jescar, и у SM очень хорошо сформированные шипы и зазубрины, и они очень стабильны. Я буду ссылаться на номера Dunlop ниже, но только для очень общего описания — всегда проверяйте фактические размеры!
Гитарные лады могут варьироваться от 0,070 дюйма (узкие, мандолины уже) до 0,15 дюйма (Ibanez JEMs и Dunlop 6000) в ширину и ~ 0,02x (действительно изношенные, безладовые чудеса и т. Д.) До 0,057 дюйма (Jescar FW11057 или лада. что не сидит хорошо).
«Винтажный» лад чаще всего известен как «средний» лад, и этот размер в сегодняшних измерениях обычно используется.080-.040 «; то, что вы обычно видите на акустике Fender RI или Martin. Я упоминаю об этом, так как лада действительно различается, а некоторые» винтажные «провода на гитарах были такими узкими, как 0,070». В номерах Dunlop он обычно обозначается как 6230.
Узкий лад относится к винтажным / средним размерам и варьируется от 0,070 до 0,095 дюйма в ширину. Доступны высокие / узкие размеры — SM 155 на 0,080-0,050 дюйма и FW09055 (6105) на 0,090-0,055 дюйма
.Средний Jumbo на языке старой школы обычно означает ~.Ширина 100–104 дюйма и высота 0,040–048 дюйма. Впервые они появились в 1959 году на гитарах Gibson (некоторые говорят, что это конец 1958 года). Средний относится к высоте, а большой — к ширине. PRS использует исключительно средний размер jumbo (за исключением моделей Santana, произведенных в США, которые используют немного больший размер).
Ладная проволокаJumbo — действительно большая штука, такая как Dunlop 6100 и эквивалентные размеры ~ .110–055 ”или Dunlop 6000 (серия Ibanez JEM).
Electric бас-гитары, как правило, используют средний джамбо лад, как и большинство фендеров на протяжении многих лет.Есть некоторые люди, которым нравится средний или даже очень узкий / малый лад мандолины для басов — это больше похоже на винтаж, как и самые ранние басы Fender (Fender создал Precision Bass в 1951 году). Поскольку высота струн для басовых струн выше из-за калибра и настройки, их легко брать в руки, и многие басисты, похоже, не так озабочены высотой ладов, как гитаристы.
Доступные размеры ладов см. Здесь:
http://www.jescar.com/fretwire.html
http: // www.stewmac.com/shop/Fretting_supplies/Stewart-MacDonald_Fretwire.html
Если вы хотите измерить размер лада на существующих инструментах, хороший способ сделать это — приобрести недорогой штангенциркуль (например, Harbor Freight и т. Д.). Вы можете измерить ширину с помощью внешних губок (не забудьте обнулить штангенциркуль для точных измерений), но для высоты (если вы не собираетесь надрезать стержень глубины и вычитать разницу) используйте кусок чего-то вроде униформы. толщину и просверлите в нем отверстие для стержня глубины, поместите его на два лада и измерьте расстояние от отверстия (обычно около короны) до грифа и вычтите толщину вашей детали.При измерении высоты лада всегда полезно измерить несколько разных мест на грифе, так как высота может варьироваться в зависимости от уровня и износа. На многих гитарах (но не на всех) верхние лады (если нет выступа в области шейного сочленения, который учитывалась во время выравнивания) будет хорошим индикатором высоты лада.
Лады на готовых грифах может быть трудно измерить точно, когда покрытие имеет значительную толщину (например, Rickenbackers, Fenders 70-х годов), поскольку эти производители распыляют покрытие на гриф с ладами.Я измерил финишную стружку от рефрета кленового грифа Fender 70-х годов, который был толщиной 0,010 дюйма, что снизило высоту лада на 0,010 дюйма (25% в случае стандартной проволоки среднего размера в то время) от одного только финиша. Недавно я обновил Fender Eric Johnson Strat 2008 года выпуска, у которого высота лада до любой работы составляла 0,040 дюйма, а верхняя часть лада, снятая с грифа, была 0,045 дюйма. Мне лично не нравится это ощущение, и поэтому я часто предлагаю повторно натягивать готовый гриф при работе с ними, а не под финишем.
Если вы не можете найти точный размер, который вы предпочитаете, вы можете выбрать размер с нужной шириной, но с большей высотой и уровнем, а затем вниз до нужного вам размера. Бывают случаи (обычно во время частичных рефретов), когда я меняю ширину лада, чтобы она подходила к вам; это добавляет дополнительное время к подготовительной работе, поэтому я беру соответствующую плату.
Нет никакого реального правила о том, какой размер ладов лучше всего — это чисто личное предпочтение. Чтобы узнать, какой размер подходит вам или для конкретной гитары и применения, вам, возможно, придется попробовать похожие гитары с разными ладами.Я слышал много разных мнений по поводу размера ладов на протяжении многих лет; некоторые говорят, что высокая проволока слишком неровная для того, чтобы ее можно было вставить в нужное положение, или что из-за высокой проволоки они играют резко (из-за чрезмерного давления на струны эти игроки привыкли ощущать поверхность грифа кончиками пальцев). Некоторые говорят, что лада ниже определенной высоты трудно согнуть. Техника сгибания и раздражения рукой становится проще, когда струна может быть обращена к середине кончика пальца, чтобы ее можно было толкать и тянуть сбоку, а не трогать ее прямо сверху нижней частью кончика пальца.Некоторым людям нравится низкий лад, потому что он кажется им очень гладким, и они не делают много размытых приемов.
Комментарий редакции — при рассмотрении лепнины я советую не выбирать размер или операцию выравнивания, приводящую к высоте менее 0,040 дюйма, если они хотят играть стиль с частым невнятным звуком ладовой руки, то есть рок, блюз, шред и т. Д. Низкий лад Высота менее способна выдержать разумное выравнивание ладов в будущем, что делает его намного ближе ко времени восстановления.Необязательно выбирать очень высокий размер, если вам это неудобно. Выбирайте меньшую высоту только в том случае, если это действительно то, что вы хотите и к чему вы привыкли.
Мои личные фавориты — это размер 0,090-0,055 дюйма для большинства применений электрогитары, за которым следуют 0,100-0,050 дюйма для большего количества ладов, которые я считаю ладом гитары Gibson / PRS / modern jazz blues — оба размера великолепны для гибки. Мне нравится классический средний .080–040 ”для акустики.
Причина №1 износа ладов — это давление руки, оказываемое игроком.У меня есть клиенты, которые очень крепко сжимают лады и быстро надевают лады (Роб Фэйи), а некоторые — очень легко держатся и требуют целую вечность, чтобы продемонстрировать значительный износ (Джасан Степп, Dog Fashion Disco / PolkaDot Cadaver). Твердость материала лада, твердость струн и частота использования также способствуют износу, но давление руки по-прежнему является основной причиной, поскольку лады не изнашиваются сами по себе. Техника игры индивидуальна для каждого игрока, уникальна и индивидуальна, а привычки сложно изменить. Как и в случае с тормозами в автомобиле, сила и интенсивность движения напрямую влияют на износ и долговечность.Дополнительные мысли по этой теме см. На странице обновлений.
8 марта (3/8/2112) — Утро и вечер Чарльза Сперджена
Утро
«Мы должны пройти через многие невзгоды в Царство Божье».
Деяния 14:22
Народ Божий переживает свои испытания. Когда Он выбирал свой народ, Бог никогда не планировал, что они должны быть непроверенными людьми. Они были избраны в горниле скорби; они никогда не были избраны для мирского мира и земных радостей.Им никогда не обещали свободу от болезней и смертных страданий; но когда их Господь составил хартию привилегий, он включил наказания в число вещей, наследниками которых они должны были неизбежно. Испытания — часть нашего удела; они были предопределены для нас в последнем наследии Христа. Так же верно, как звезды созданы его руками и их орбиты определены им, так несомненно наши испытания назначены нам: Он определил их время и их место, их интенсивность и влияние, которое они окажут на нас.Хорошие люди никогда не должны надеяться избежать неприятностей; если они это сделают, они будут разочарованы, поскольку никто из их предшественников не обходился без них. Отметьте терпение Иова; вспомните Авраама, потому что у него были свои испытания, и благодаря его вере он стал «Отцом верных». Внимательно обратите внимание на биографии всех патриархов, пророков, апостолов и мучеников, и вы не обнаружите никого из тех, кого Бог создал сосудами милосердия, которые не были созданы для того, чтобы пройти через огонь скорби. Издавна предписано, чтобы крест скорби был выгравирован на каждом сосуде милосердия, как королевский знак, которым выделяются королевские сосуды чести.Но хотя скорбь — это путь детей Божьих, они утешаются тем, что их Учитель прошел этот путь до них; у них есть его присутствие и сочувствие, чтобы подбодрить их, его благодать, чтобы поддержать их, и его пример, чтобы научить их терпеть; и когда они достигнут «царства», это более чем возместит «много бедствий», через которые они прошли, чтобы войти в него.
Вечер
«Она назвала его имя Бен-они (сын печали), но его отец назвал его Вениамином (сыном моей правой руки).
Бытие 35:18
У всякого дела есть как светлая, так и темная сторона. Рахиль была захвачена горем собственных мучений и смерти; Иаков, хотя и оплакивал утрату матери, видел милосердие ребенка. Это хорошо для нас, если, пока плоть оплакивает испытания, наша вера восторжествует в божественной верности.Лев Самсона дал мед, и наши невзгоды, если их правильно рассматривать, тоже будут. Бурное море кормит множество своей рыбой; дикий лес цветет красивыми цветками; бурный ветер сметает мор, а лютый мороз разрыхляет почву.Темные облака рождают яркие капли, а на черноземе растут веселые цветы. В каждой копи зла можно найти жилу добра. Печальные сердца обладают особым умением находить наиболее невыгодную точку зрения, с которой можно смотреть на испытание; если бы в мире была только одна топь, они бы скоро оказались в ней по шею, а если бы в пустыне был только один лев, они бы услышали его рев. Во всех нас есть оттенок этой жалкой глупости, и иногда мы, как Иаков, склонны кричать: «Все это против меня.«Путь веры — это возложить всю заботу на Господа и затем ожидать хороших результатов от самых страшных бедствий. Подобно людям Гедеона, она не беспокоится о разбитом кувшине, но радуется тому, что лампа горит сильнее. из грубой устричной раковины трудностей она извлекает редкую жемчужину чести, а из глубоких океанских пещер бедствий она поднимает бесценный коралл опыта. Когда ее поток процветания отступает, она находит сокровища, спрятанные в песках; солнце восторга садится, она обращает свой телескоп надежды к звездным обещаниям небес.Когда появляется сама смерть, вера указывает на свет воскресения за могилой, таким образом делая нашего умирающего Бен-они нашим живым Вениамином.
FRET Визуализация диатомовых водорослей, экспрессирующих локализованный биокремнезем датчик рибозы
Abstract
Предусматривается, что материалы будущего будут включать биоорганизованные, гибридные, трехмерные наносистемы, которые включают функциональные белки. Диатомовые водоросли поддаются генетической модификации для локализации рекомбинантных белков в клеточной стенке биокремнезема.Однако полный спектр белковых функций, которые могут быть реализованы в модифицированном пористом биокремнеземе, еще предстоит описать. Наша цель состояла в том, чтобы функционализировать диатомовый биокремнезем с помощью безреагентного сенсора, зависящего от связывания лиганда и конформационных изменений, чтобы управлять возможностями передачи сигналов на основе FRET. Слитый белок, разработанный для придания таких свойств, включал бактериальный периплазматический связывающий рибозу белок (R), фланкированный CyPet (C) и YPet (Y), голубыми и желтыми флуоресцентными белками, которые действуют как пара FRET.Структура и функция рекомбинантного химерного белка CRY была подтверждена экспрессией в E. coli до трансформации диатомовой водоросли Thalassiosira pseudonana . Масс-спектрометрия рекомбинантного CRY показала 97% идентичность с рассчитанной аминокислотной последовательностью. CRY с N-концевой меткой Sil3 и без нее для локализации биокремнезема обнаруживал характерные рибозозависимые изменения FRET с аналогичными константами диссоциации 123,3 мкМ и 142,8 мкМ, соответственно.Добавление тега Sil3 не изменяет сродство CRY к субстрату рибозы. Последующая трансформация T. pseudonana вектором, кодирующим Sil3-CRY , привела к локализации флуоресценции в биокремнеземе и изменениям FRET как в живых клетках, так и в изолированных панцирях в ответ на рибозу. Эта работа продемонстрировала, что наноархитектура генетически модифицированной клеточной стенки биокремнезема способна поддерживать функциональность относительно сложного слитого белка Sil3-CyPet-RBP-YPet с его потребностью в связывании лиганда и конформационных изменениях для генерации сигнала FRET.
Образец цитирования: Marshall KE, Robinson EW, Hengel SM, Paša-Tolić L, Roesijadi G (2012) FRET-визуализация диатомовых водорослей, экспрессирующих датчик рибозы, локализованный в биокреме. PLoS ONE 7 (3): e33771. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771
Редактор: Анна Митраки, Университет Крита, Греция
Поступила: 16 ноября 2011 г .; Одобрена: 21 февраля 2012 г .; Опубликован: 21 марта 2012 г.
Авторские права: © 2012 Marshall et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.
Финансирование: Это исследование было частично поддержано Управлением военно-морских исследований, номер награды N0001409IP20071 (http://www.onr.navy.mil/). Исследования с использованием масс-спектроскопии были частично поддержаны американским Законом о реинвестировании и восстановлении от 2009 года и U.S. Отдел биологических и экологических исследований Министерства энергетики (DOE). Участие студентов частично финансировалось программой стажировки в лаборатории естественных наук Министерства энергетики США. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.
Конкурирующие интересы: У авторов нет поддержки или финансирования, чтобы сообщить о них.
Введение
Ожидается, что создание трехмерных материалов будущего с многомасштабной архитектурой будет включать биосборку [1].Самосборка посредством биосинтеза в живых организмах может заменить химический синтез гибридных структур с функциональными элементами, иммобилизованными в высокоупорядоченных биоминеральных структурах, подобных тем, которые встречаются в природе. Клеточные стенки биокремнезема диатомовых в течение некоторого времени были признаны иерархически упорядоченными, мезопористыми структурами от микро до нанометров, которые могут служить основой для разработки современных материалов [2]. Попытки конструировать кремнеземные материалы, вдохновленные пониманием биологии диатомовых водорослей, включали 1) конденсацию кремнезема из кремниевой кислоты in vitro с использованием силафинов или пептидов, полученных из силуффина [3] — [7] и 2) манипулирование живыми клетками для добавлять функциональные элементы путем метаболической вставки [8], [9] или генетической модификации структуры клеточной стенки [10], [11].Последние подходы на основе клеток позволяют сборку в физических и химических условиях окружающей среды, присущих культуре клеток диатомовых водорослей.
Недавние успехи в разработке систем трансформации диатомовых водорослей позволили сконструировать векторы экспрессии, которые могут нацеливать локализацию рекомбинантных белков на клеточную стенку биокремнезема [10]. Зеленый флуоресцентный белок (GFP) и ферменты с мультимерной структурой и / или требующимися кофакторами были успешно иммобилизованы в биокремнеземе Thalassiosira pseudonana , помечая их силаффином Sil3, который нацелен на локализацию в клеточной стенке биокремнезема [10], [10], [10] 12].Наша цель состояла в том, чтобы проверить способность биокремнезема диатомовых водорослей служить в качестве каркаса для сложных химерных слитых белков, требующих крупномасштабных движений, связанных с лиганд-зависимыми конформационными изменениями, чтобы функционировать.
Для достижения этой цели мы построили датчик рибозы, который использует сигнальную систему, основанную на изменениях в передаче энергии резонанса Фёрстера (FRET) для локализации в биокремнезе диатомовых водорослей. Сенсорная конструкция включала бактериальный периплазматический связывающий рибозу белок (RBP; [13]), фланкированный флуоресцентной парой FRET CyPet и YPet [14] — [16], создавая сенсорную кассету CyPet-RBP-YPet (CRY), для которой требуется рибоза. связывание и конформационное изменение RBP, чтобы управлять изменениями в FRET.Вставка последовательности силаффина Sil3 перед CRY нацелена на химерный белок для локализации в биокремнеземе диатомовых водорослей. Здесь мы сообщаем об успешной функционализации T. pseudonana с помощью сложного безреагентного сенсора, иммобилизованного в клеточной стенке биокремнезема. Это исследование демонстрирует потенциал диатомовой системы для размещения сложных белков в трехмерном гибридном материале посредством биосборки в условиях окружающей среды.
Результаты
Конструкция и характеристики датчика CRY
Конструкция рекомбинантного сенсора CRY была основана на конструкции FLIPrbs-F15A (мутантная форма F15A; [13]), кодирующей RBP, фланкированную усиленными голубыми и желтыми флуоресцентными белками, ECFP и EYFP, соответственно.Мы заменили пару ECFP-EYFP FRET последовательностями, кодирующими флуоресцентные белки CyPet и YPet [16], и клонировали полученную последовательность CyPet-RBP-YPet в вектор pRSET для бактериальной экспрессии, управляемой промотором T7 . Две последовательности His 6 фланкировали рекомбинантную кассету CyPet-RBP-YPet с получением белка «His 6 -CyPet-RBP-YPet-His 6 » (CRY) массой приблизительно 87,6 кДа.
Идентификационный номер E.coli -экспрессируемый рекомбинантный белок CRY и его функциональность FRET проверяли с помощью ЖХ-МС / МС и экспериментов по связыванию лиганда, соответственно. Масс-спектрометрия химерной конструкции подтвердила 97% аминокислотной последовательности слитого белка CRY (рис. 1). В части последовательности RBP (L341M) произошла точечная мутация лейцина в метионин, что подчеркивает возможности масс-спектрометрии в обнаружении небольших различий в выведенных и проанализированных аминокислотных последовательностях. Неидентифицированные остатки находились в 21 положении внутри CyPet и в одном положении в части RBP химерного белка.Ион-предшественник для первого наблюдался в нескольких сканированиях МС, однако спектры МС / МС не были достаточно высокого качества, чтобы дать положительную идентификацию с нашими строгими критериями фильтрации. Эти несоответствия не были локализованы в кармане связывания рибозы или функциональном домене шарнирного поворота RBP [17], и не ожидалось, что они повлияют на общую производительность сенсорной кассеты.
Рис. 1. Масс-спектрометрия для проверки аминокислотной последовательности выведенного белка CRY.
Образцы белка переваривали отдельно протеазами глюкозы и трипсина и анализировали с использованием ЖХ-МС / МС с высоким разрешением.Масс-спектрометрия подтвердила 97% выведенной рекомбинантной последовательности CRY. Остальные 3% были либо неидентифицированными, либо представляли несоответствие в 1 аминокислоте (*). Синяя заливка = последовательность CyPet; Красная заливка = последовательность RBP; Желтая заливка = последовательность YPet; Серый = линкерные последовательности; Черные линии = его теги 6 и Xpress ™.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g001
Перед экспрессией в диатомовых водорослях мы проверили функциональность FRET рекомбинантных CRY и Sil3-CRY, экспрессируемых E. coli , путем тестирования чувствительности сенсор конструирует добавленную рибозу.Связывание рибозы с рецептором сдвигает амино- и карбоксильные концы RBP дальше друг от друга и увеличивает расстояние между CyPet и YPet, что приводит к снижению FRET (рис. 2). Связывание рибозы с RBP привело бы к уменьшению отношения относительной интенсивности флуоресценции желтый / голубой (530/485 нм), связанного с уменьшением FRET.
Рис. 2. Модель индуцированного рибозой конформационного изменения CRY и связанного с ним снижения FRET.
Несвязанный: в отсутствие рибозы рибозосвязывающий белок (RBP) находится в открытой конфигурации с C и Y, которые присоединены к амино- и карбоксильным концам RBP, соответственно, в непосредственной близости друг от друга.Когда CRY возбуждается на длине волны 435 нм, излучение C возбуждает Y, что приводит к высокому отношению интенсивностей излучения 530/485. Связано: связывание рибозы (R) с помощью RBP вызывает конформационные изменения в RBP, которые разделяют амино- и карбоксильные концы RBP, тем самым увеличивая расстояние между C и Y. Это увеличение расстояния снижает передачу энергии между двумя флуоресцентными белками, тем самым уменьшая соотношение интенсивностей излучения 530/485. Таким образом, увеличение концентрации рибозы приводит к снижению FRET.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g002
В соответствии с этим поведением, снижение эффективности FRET в зависимости от увеличения концентрации рибозы было очевидно из кривых насыщения (рис. 3). Соответствующие константы диссоциации ( K d ) 123,3 мкМ для CRY и 142,8 мкМ для Sil3-CRY существенно не отличались друг от друга или от ранее опубликованных K d 119 мкМ для ECFP-RBP. Конструкция -EYFP, кодируемая FLIPrbs- F15A [13] (p> 0.1 для всех сравнений). Таким образом, замена CyPet и YPet на ECFP и EYFP, соответственно, и добавление тега Sil3 к CRY не показали значительного изменения сродства рецептора к рибозе.
Рисунок 3. Зависимый от рибозы FRET в рекомбинантном CRY и Sil3-CRY, экспрессируемый в E. coli .
Образцы выделенных белков CRY и Sil3-CRY обрабатывали различными концентрациями рибозы в диапазоне от 1 мкМ до 10 мМ. Анализаторы K d для CRY и Sil3-CRY существенно не отличаются друг от друга (см. «Материалы и методы» для получения подробной информации о расчетах и статистическом анализе K d ).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g003
Экспрессия CRY у диатомовых водорослей
Определив, что кассета Sil3-CRY функционирует, как ожидалось in vitro , диатомовую водоросль T. pseudonana трансформировали pTpfcp / Sil3-CRY: fcp / nat , вектор экспрессии Sil3-CRY для диатомовых водорослей. бомбардировкой микрочастицами под высоким давлением [11]. В этом векторе кодировались как кассета экспрессии Sil3-CRY , так и ген nat , придающий устойчивость к нурсеотрицину.
ПЦР-амплификация геномной ДНК, выделенной из трансформированных диатомовых водорослей, давала электрофоретические полосы, соответствующие генам CRY и nat , которые отсутствовали у нетрансформированных диатомовых водорослей дикого типа. ОТ-ПЦР библиотек кДНК первой цепи привела к появлению полос, соответствующих генам CRY и nat в трансформированных образцах, но не в нетрансформированных образцах (данные не показаны). Эти результаты означают успешную трансформацию и экспрессию генов у трансформированных диатомовых водорослей.
Мы подтвердили наличие рекомбинантного CRY в трансформированных диатомовых водорослях и их изолированных клеточных стенках из биокремнезема с помощью флуоресцентной микроскопии и визуализации проточной цитометрии (рис. 4A и 4B, соответственно). Мы использовали флуоресцентную микроскопию для изображения как трансформированных живых клеток, так и изолированных панцирей. Это выявило отчетливый периметр голубой флуоресценции, согласующийся с локализацией Sil3-CRY в биокремнеземе как в трансформированных клетках, так и в изолированных оболочках биокремнезема (Fig. 4A). Эта флуоресценция перекрывалась периметром диатомовых водорослей на изображениях в светлом поле и соответствовала локализации CRY в клеточной стенке биокремнезема.Очевидная совместная локализация CRY в хлоропласте была приписана просачиванию интенсивной красной автофлуоресценции хлорофилла в голубой и желтый каналы. Это наблюдение было рассмотрено с помощью визуализации проточной цитометрии.
Рис. 4. Флуоресцентные изображения трансформированных и нетрансформированных живых диатомовых водорослей и изолированного биокремнезема.
(A) Флуоресцентная микроскопия: живые трансформированные клетки и изолированные створки биокремнезема были визуализированы в ярком поле для отображения клеточной структуры и для голубой флуоресценции CyPet и красной автофлуоресценции, чтобы показать их соответствующую локализацию в биокремнеземе и хлоропластах.Отсутствие красной автофлуоресценции в изолированном биокремнеземе подчеркивает отсутствие хлоропластов и, следовательно, отсутствие клеточного материала в клеточной стенке биокремнезема. (B) Визуализация проточной цитометрии: pTpfcp / Sil3-CRY: трансформированные (TR) и нетрансформированные (WT) клетки fcp / nat- были визуализированы для светлого поля, голубой флуоресценции CyPet, желтой флуоресценции YPet из FRET и автохлоропластов. флуоресценция. Голубые, желтые и красные изображения были объединены, чтобы выделить флуоресценцию CyPet и YPet, фланкирующих хлоропласты.В клетках WT обнаруживалась только красная аутофлуоресценция хлоропластов.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g004
Изображения эпифлуоресценции, полученные с помощью проточной цитометрии, были выбраны для дальнейшего анализа с использованием следующих критериев: 1) были получены изображения только отдельных клеток в фокусе, а не скоплений в поле зрения, 2) изображения были положительными в отношении автофлуоресценции красного хлорофилла, и 3) изображения были положительными в отношении полученной из FRET желтой флуоресценции.Эти критерии позволили нам рассмотреть отдельные живые клетки, обозначенные наличием хлорофилла, и проанализировать интенсивность флуоресценции и структуру внутри клетки. Вытекание автофлуоресценции красного хлоропласта было компенсировано в каналах CyPet и YPet.
Путем стробирования каждой популяции, как указано выше, мы проанализировали 21,3% трансформированной популяции и 2,9% нетрансформированной популяции дикого типа для дальнейшего анализа. В трансформированной субпопуляции локализацию голубой и желтой флуоресценции, связанной с CRY, можно было отличить от красной аутофлуоресценции хлорофилла.Клетки с голубой и желтой флуоресценцией, смежные с красной флуоресценцией хлоропласта, а не одновременно в одном и том же клеточном местоположении, были преобладающими (объединенное изображение на фиг. 4B TR). Интенсивность голубой и желтой флуоресценции в клетках дикого типа обычно была слабой или неопределяемой (рис. 4B WT).
FRET в живых диатомовых водорослях и изолированных клеточных стенках биокремнезема
Хотя изначально было неясно, будут ли конформационные изменения RBP, необходимые для управления изменениями FRET, ограничиваться доступностью субстрата или стерическими препятствиями, связанными с иммобилизацией Sil3-CRY в нанопористой архитектуре клеточной стенки биокремнезема, изменения FRET, вызванные рибозой, были наблюдается как в живых трансформированных клетках, так и в изолированных клеточных стенках биокремнезема (ответ репрезентативной клетки показан на рис.5А и 5Б). При уровне насыщения рибозы 300 мМ соотношение FRET (530/485 нм относительные флуоресцентные единицы [RFU]) снизилось в среднем на 0,19 ± 0,01 (1 SE, n = 10) и 0,43 ± 0,04 (1 SE, n = 4) в трансформированных живых клетках и изолированных клеточных стенках биокремнезема соответственно. Это различие между трансформированными клетками и изолированным биокремнезем было очень значимым (p <0,001), как и разница между этими значениями и соответствующими фоновыми изменениями в нетрансформированных контрольных структурах дикого типа (рис.5A и 5B) (p <0,05). Кривая "концентрация-ответ" для внешних концентраций рибозы у живых трансформированных диатомовых водорослей показала ЕС 50 , равное 23,3 мМ (фиг. 6). Сравнение этого значения с субстратным сродством CRY E. coli (рис. 3) и значительно большее снижение FRET в изолированном биокремнеземе по сравнению с живой клеткой позволило предположить, что клеточный матрикс затрудняет доступ рибозы к клеткам. датчик с иммобилизованным кремнеземом.
Рисунок 5.Рибозозависимая визуализация FRET у живых, трансформированных диатомовых водорослей и изолированного биокремнезема.
(A) Для получения изображения флуоресценции CyPet и YPet до и после добавления 300 мМ рибозы использовали покадровую визуализацию живых клеток. Флуоресцентные изображения регистрировались одновременно в обоих флуоресцентных каналах каждую минуту в течение 40 минут. Рибозу добавляли к клеткам через 20 мин после первоначальной визуализации. Соотношение FRET (соотношение RFU 530/485 нм) уменьшается при добавлении рибозы. (B) Аналогичным образом, покадровую визуализацию клеточных стенок биокремнезема проводили в течение 10 минут с добавлением 300 мМ рибозы через 5 минут.Соотношение FRET уменьшается в ответ на добавление рибозы.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g005
Рис. 6. Концентрация-реакция pTpfcp / Sil3-CRY: fcp / nat- трансформированных диатомовых водорослей, подвергшихся воздействию рибозы.
Нормализованные значения ΔFRET (ΔF n ) для отдельных клеток, обработанных рибозой. ЕС 50 , равный 23,3 ± 4,7 мМ (среднее ± стандартное отклонение), соответствует концентрации рибозы, дающей 50% от максимального значения ΔF n .
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0033771.g006
Обсуждение
Наноразмерная иерархическая организация диатомового кремнезема представляет интерес как модель для синтеза материалов, особенно в контексте силицификации при умеренном pH и температуре окружающей среды [18]. Первоначальные исследования в этой области были сосредоточены на использовании поликатионных пептидов диатомовых водорослей, силафинов [5], [19], в химическом синтезе гибридных комплексов силаффин-кремнезем из кремниевой кислоты.Эта работа была расширена до создания реакторов с иммобилизованными ферментами путем добавления в реакцию ферментов, таких как каталаза, пероксидаза хрена и бутирилхолинэстераза, и конъюгации полиаминов с лизинами для имитации взаимодействия между силафинами и полиаминами при осаждении диоксида кремния из кремниевой кислоты [ 20] — [22]. В обоих случаях белки нацелены на локализацию в матрице кремнезема.
Разработка системы трансформации диатомовых водорослей открыла возможность генетических манипуляций со структурой биокремнезема посредством экспрессии рекомбинантных химерных белков, которые включают силуффин или, в последнее время, цингулин как часть химерной слитой конструкции [23].Оба последних белка могут закрепить конструкцию в биокремнеземе и связаны с функциональными белками, которые локализуются в биокремнеземе и сохраняют функцию, когда биокремнезем изолирован от клетки [10], [12]. К протестированным на сегодняшний день белкам относятся белки с мультимерной структурой субъединиц и требованиями к кофакторам [12]. Было интересно определить, могут ли сложные химерные слитые белки, которые включают несколько белковых модулей и имеют требования к связыванию лиганда и крупномасштабным движениям, функционировать в рамках пространственных ограничений биокремнезема диатомовых водорослей.
Поскольку не было известно, будет ли метка Sil3 препятствовать связыванию рибозы с помощью RBP, конформационному изменению RBP в ответ на рибозу или пространственным взаимодействиям CyPet и YPet, в первоначальных экспериментах изучали FRET в очищенном рекомбинанте, экспрессируемом E. coli . CRY и Sil3-CRY. FRET как для CRY, так и для Sil3-CRY функционировали, как ожидалось, демонстрируя сходство K d друг с другом и с конструкцией ECFP-RBP-EYFP, кодируемой FLIPrbs-F15A [13].Мы также продемонстрировали функциональность датчика на живых диатомовых водорослях и изолированном биокремнезе. Наше исследование показало, что сенсорная кассета, полученная в результате слияния четырех белков с меткой, нацеленной на биокремнезем, была локализована на клеточной стенке диатомовых T. pseudonana и могла претерпевать необходимые пространственные перестройки, необходимые для функционирования в качестве сенсора FRET.
Иммобилизация функциональных рекомбинантных белков в biosilica диатомовых водорослей посредством in vivo биосборки теперь продемонстрирована для GFP и HabB [10]; β-глюкуронидаза, глюкозооксидаза, галактозоксидаза и пероксидаза хрена [12]; и CRY (наше текущее исследование).Их точная локализация и плотность в биокремнеземе, которые представляют интерес с прикладной точки зрения, связанной с характеристиками гибридных кремнеземных материалов, еще не сообщены. Судя по наблюдениям, опубликованным на сегодняшний день, они, вероятно, будут связаны с внешней и внутренней поверхностями биокремнезема и / или внутри пор биокремнезема. Минимальные радиусы для этих белков, оцененные по молекулярной массе от 16900 до 272000, колеблются от 1,69 до 4,27 нм [24] и соответствуют требованиям к видимому размеру для включения в поры Тл.pseudonana (средний диаметр пор клапана 18,2 нм [25]). Таким образом, за исключением других факторов, несколько молекул CRY (расчетная молекулярная масса 87 600 и минимальный радиус 2,79 нм) могут быть размещены в архитектуре единой пористой структуры. T. pseudonana с диаметром створки от 3 до 4 мкм [25] — относительно небольшая диатомовая водоросль. Родственные виды Thalassiosira , такие как T. eccentrica , T. punctigera и T. weissflogii , крупнее и имеют значительно большие размеры пор [26], [27].Более того, пористость панциря T. eccentrica на уровне 37% значительна [26]. Эти виды, по-видимому, обладают потенциалом для размещения большего количества иммобилизованного белка и могут быть кандидатами для генетических манипуляций для биотехнологических применений с использованием подходов, разработанных для T. pseudonana .
Благодаря достижениям, достигнутым в настоящее время в технологиях инженерии диатомовых водорослей и генетике, функции диатомей, такие как катализ, хелатирование и биочувствительность, становятся потенциальными приложениями, если желаемые функции могут быть закодированы в виде белков.Иммобилизация белков в поддерживающих матрицах из мезопористого диоксида кремния выгодна для широкого круга применений в медицинской диагностике и терапии, биочувствительности, катализе и взаимодействии / ингибировании субстрата. Лучшее понимание принципов конструкции, лежащих в основе сборки клеточных стенок биокремнезема диатомовыми водорослями, должно способствовать будущей биосборке in vivo генетически модифицированных структур биокремнезема в трансформированных диатомовых водорослях [10], [11] и информировать о биологически вдохновленной химической сборке. белковых структур с иммобилизованным кремнеземом in vitro [3], [4], [28] — [30].
Материалы и методы
Построение конструкции экспрессии бактерий и диатомовых водорослей
Стандартные методы клонирования использовали для вставки в рамку генов CyPet, периплазматического белка, связывающего рибозу (RBP) и YPet , в сайт множественного клонирования, кодируемый в векторе бактериальной экспрессии pRSET . CyPet и YPet составляют пару FRET флуоресцентного белка [16]. Вектор pRSET содержит промотор T7 , управляющий экспрессией CRY .Вектор pRSET разработан для кодирования двух N-концевых меток, полигистидиновой метки (His 6 ) для очистки на Ni-колонке и эпитопа Xpress ™ для обнаружения с помощью антитела Anti-Express ™, а также сайта расщепления энтерокиназой выше по течению. стартового сайта для CRY. Мы включили дополнительную метку His 6 на С-конце YPet для повышения сродства к никелю. Флуоресцентные белки были присоединены к RBP посредством вставки полилинкерной последовательности, кодирующей Gly-Gly-Ser.После подтверждения последовательности экспрессионная последовательность CyPet-RBP-YPet (CRY) была вставлена ниже кДНК, кодирующей Silaffin 3 (Sil3) , выделенной с помощью ОТ-ПЦР из диатомовых водорослей T. pseudonana (штамм CCMP 1335, Национальный центр морских водорослей и микробиоты Провасоли-Гийярда, Вест-Бут-Харбор, Массачусетс). В результате были получены две конструкции для бактериальной экспрессии: pRSET: CRY и pRSET: Sil3-CRY . Сообщается, что конформационные изменения, связанные со связыванием рибозы с RBP, приводят к увеличению пространственного разделения пары FRET флуоресцентного белка и снижению FRET [13].
Геномная последовательность Sil3 была использована в векторе экспрессии диатомей pTpfcp / Sil3nt , нацеленного на биосиликат [10]. Для создания единой системы трансформации вектора для экспрессии CRY , нацеленной на клеточную стенку биокремнезема у диатомовых водорослей, последовательность CRY была клонирована в pTpfcp / Sil3nt между геномными последовательностями терминатора Sil3 и fcp . Ген отбора антибиотиков nat был вставлен ниже второго промотора fcp , придающего антибиотикорезистентность нурсеотрицину, в результате чего был получен вектор экспрессии диатомовых водорослей pTpfcp / Sil3-CRY: fcp / nat .
Векторы CyPet и YPet были предоставлены Патриком Догерти, Калифорнийский университет, Санта-Барбара; последовательность RBP была клонирована из FLIPrbs-F15A , предоставленной Вольфом Фроммером, Научный институт Карнеги, Стэнфордский университет; и pTpfcp / Sil3nt и pTpfcp / nat были предоставлены Николь Поулсен и Нильсом Крегером, Технологический институт Джорджии.
Экспрессия и выделение
E.coli -экспрессированные рекомбинантные белкиTurboCells BL21 (DE3), компетентный E. coli (Genlantis, Inc., Сан-Диего, Калифорния), трансформированный бактериальными экспрессирующими конструкциями, выращивали в течение ночи при 37 ° C. OD 600 Измерения были произведены, и культуры были снова разбавлены до OD 600 0,5. Клетки выращивали при 37 ° C до достижения OD 600 1,0. Затем экспрессию белка индуцировали добавлением IPTG (изопропил B-D-тиогалактозид) в концентрации 100 мкМ; культуры переносили при 26 ° C и выращивали в течение ночи в темноте.Экспрессированный белок выделяли с помощью Ni-аффинной хроматографии (смола His-Bind, Novagen, Inc.). Клетки лизировали ультразвуком, центрифугировали и лизат стерилизовали фильтрованием перед нанесением на колонку. Колонки, связанные с белками, промывали возрастающими концентрациями имидазола в диапазоне от 5 мМ до 500 мМ. Селективные промывки объединяли и концентрировали в системе фильтрации Amicon 50 кДа (EMD MilliPore). Очистку белка контролировали с помощью SDS-PAGE с использованием 10% полиакриламидного геля (Bio-Rad Laboratories, Inc.).
Масс-спектрометрия
E. coli -экспрессируемого рекомбинантного белкаобразцов белка CRY, выделенных, как описано выше, заменяли буфером на 200 мМ бикарбоната аммония, отдельно расщепляли протеазами глюкозы и трипсина и анализировали с помощью ЖХ-МС / МС высокого разрешения на платформах LTQ Velos Orbitrap (Thermo Scientific, Waltham, MA). Первоначальная идентификация пептидов была произведена с помощью SEQUEST с использованием базы данных E. coli , содержащей последовательность белка CRY.Точечная мутация лейцина в метионин, L341M, была идентифицирована с использованием собственных инструментов секвенирования de novo [31], а также может быть идентифицирована с помощью SEQUEST при использовании последовательности CRY, включая точечную мутацию. Другие пептидные последовательности, идентифицированные с помощью SEQUEST, также были проверены с помощью собственных инструментов секвенирования de novo .
In vitro Анализ FRET в E. coli -экспрессированных рекомбинантных белковКривые титрования субстрата для очищенных рекомбинантных белков получали на спектрофлуориметре Synergy-HT с длиной волны возбуждения, установленной на 430 нм (возбуждение CyPet), и эмиссией, установленной на 485 нм (эмиссия CyPet) и 530 нм (эмиссия YPet).Выделенные образцы белка разбавляли 20 мМ натрий-фосфатным буфером, pH 7,0, и определяли FRET как отношение интенсивностей эмиссии 530/485 нм.
Константу диссоциации ( K d ) для каждого белка определяли путем построения графика зависимости насыщения (S) от концентрации [s] рибозы в диапазоне от 1 мкМ до 10 мМ, используя метод, модифицированный из Lager et al [13]. . Насыщение рассчитывали как где r — отношение флуоресценции 530/485 нм для данной концентрации рибозы, r мин, — отношение 530/485 при насыщении, а r max — отношение 530/485 без добавления рибозы.Увеличение S соответствует снижению эффективности FRET. K d каждого рецептора оценивали по следующей зависимости: где n — количество сайтов связывания, а [s] — концентрация рибозы.
Статистические данные были выполнены с использованием программного обеспечения Prism v4 GraphPad, 2003. Наборы данных сравнивались друг с другом и опубликованные значения с использованием нелинейной регрессии с числом сайтов связывания, ограниченным до n = 1. F-тест использовался для проверки общего K d параметр для CRY и Sil3-CRY. K d каждого из них также тестировали в сравнении с ECFP-RBP-EYFP, кодируемым FLIPrbs-F15A [13].
Культура и трансформация диатомовых водорослей. T. pseudonana (штамм CCMP 1335) выращивали в среде f / 2 (Национальный центр морских водорослей и микробиоты Provasoli-Guillard, Вест-Бут-Харбор, Массачусетс), снабжаемой аэрацией и постоянным освещением при 18–20 ° C. Регулярное барботирование культур CO 2 поддерживало pH между 8 и 8,5, и в культуры еженедельно добавляли 100 мкг / мл пенициллина и стрептомицина.
Трансформацию диатомовых водорослей бомбардировкой микрочастицами с использованием системы доставки частиц PDS-1000 / He (Bio-Rad, Hercules, CA) проводили, как описано ранее [11]. Клетки, устойчивые к норсеотрицину, использовали для анализа локализации флуоресценции и ответа FRET.
Анализ экспрессии гена
Выделение геномной ДНК из T. pseudonana выполняли с использованием модифицированной версии протокола Genomic DNA Isolation Kit (Promega, Madison, WI).Приблизительно 2 × 10 8 клеток диатомей собирали центрифугированием и ресуспендировали в 600 мкл раствора для лизиса ядер. Клетки лизировали взбиванием шариками с последующей инкубацией при 65 ° C в течение 15 мин. Клетки обрабатывали РНКазой А, и белок осаждали с использованием раствора для осаждения белка. ДНК выделяли осаждением изопропанолом с последующей экстракцией фенол-хлороформом для удаления остаточных белков. Образцы ДНК ресуспендировали в ТЕ. Успех трансформации определяли с помощью ПЦР для вставок CRY и nat с последующим электрофорезом в агарозном геле.
Экстракцию тотальной РНК из T. pseudonana проводили с использованием модифицированной версии набора RNeasy Plant Kit (QIAGEN, Valencia, CA). Образцы лизировали в буфере RLT путем взбивания шариков в течение 3 мин с последующим осаждением этанолом и очисткой колонки в соответствии с протоколом производителя. RT-PCR с использованием праймеров oligo dT (Invitrogen, Carlsbad, CA) выполняли в соответствии с протоколом производителя для обратной транскриптазы SSIII (Invitrogen, Carlsbad, CA) с использованием 1 мкг РНК. Анализ экспрессии генов определяли с помощью ПЦР и электрофореза в агарозном геле.
Изоляция створок
Створки были выделены с использованием процедуры, описанной Poulsen et al. 2007 [10], модифицированный для достижения удовлетворительного анализа FRET. Детергенты и ЭДТА не добавляли в буфер. Клетки обрабатывали ультразвуком с использованием пяти последовательных импульсов по 30 с (звуковой дисмембратор Fisher Scientific, модель 500, амплитуда 10%) и позволяли осесть в микроцентрифуге, вращающейся только со скоростью 0,8 об / мин. Собранные таким образом створки затем визуализировали и анализировали на FRET, как описано ниже для живых клеток.
Флуоресцентная визуализация с локализацией
Флуоресценцию клеток регистрировали с помощью проточного цитометра высокого разрешения ImageStream X ® (Amnis, Co., Сиэтл, Вашингтон). Приблизительно 10 000 образцов клеток были возбуждены с использованием лазера с длиной волны 405 нм, и было получено по пять изображений на ячейку в каналах голубого, желтого, красного, светлого поля и бокового рассеяния. В лазерную линию вставляли фильтр 66SP, чтобы минимизировать аутофлуоресценцию хлоропластов. Голубые и желтые флуоресцентные изображения были компенсированы просвечиванием красной флуоресценции.После захвата изображения проточной цитометрии образцы были заблокированы для получения популяций захваченных изображений одиночных клеток, которые были в фокусе и отображали стереотипную красную автофлуоресценцию, указывающую на живые клетки. Яркость и контраст интенсивностей голубой и желтой флуоресценции были отрегулированы одинаково для каждого канала в образцах TR и WT.
Флуоресценцию, локализованную в биокреме, получали на инвертированном световом микроскопе DM IRB (Leica, Inc.) с использованием камеры SPOT и программного обеспечения для анализа изображений (SPOT, Inc.)). Живые клетки и клеточные стенки биокремнезема, собранные из клеточных культур, визуализировали на наличие голубой и красной флуоресценции. Соответственно были отрегулированы яркость и контраст.
Визуализация и анализ FRET
Клетки исследовали с использованием инвертированного светового микроскопа DM IRB (Leica, Inc.), и изображения получали с помощью камеры Photometrics CoolSNAP EZ, прикрепленной к разделителю изображений DV2 с голубыми и желтыми фильтрами излучения. Изображения клеток подвергали последующей обработке путем псевдоокрашивания каждого изображения соответствующим образом с использованием программного обеспечения MetaMorph® и перекрытия изображений для локализации белков с помощью программного обеспечения Photoshop (Adobe, Inc.). Яркость и контрастность были отрегулированы одинаково для каждого изображения.
Для анализа FRET клетки или створки были иммобилизованы на покрытых коллагеном чашках Петри диаметром 35 мм (MatTek, Ashland, MA), фотообесцвечены в течение пяти минут при 430 нм, чтобы минимизировать просачивание красной автофлуоресценции хлоропластов в CyPet. и каналы YPet, затем возбуждаемые на длине волны 430 нм импульсами с интервалом в одну минуту до 40 мин. Изображения для эмиссионных спектров 485 нм и 530 нм обрабатывали с использованием программного обеспечения MetaMorph®.FRET измеряли как отношение RFU при 530 нм и 485 нм с поправкой на фоновую флуоресценцию каждой длины волны в нейтральном месте на планшете. FRET вычислялся на попиксельной основе, а кривые FRET строились путем построения графика отношения 530/485 нм как функции времени.
Для построения кривой «концентрация-ответ» для диатомовых водорослей, подвергшихся воздействию рибозы, ΔF сначала нормализовали до ΔF max , после корректировки каждого значения на ΔF min , чтобы получить ΔF n :
EC 50 для клеточного FRET (концентрация, при которой наблюдается 50% от максимального ΔF n ) определяли путем нанесения ΔF n как функции концентрации рибозы [s]:
Благодарности
Николь Поулсен и Нильс Крегер, Технологический институт Джорджии, дали рекомендации по системе трансформации диатомовых водорослей.Бен Альдерете, Amnis Corporation, Сиэтл, Вашингтон, организовал доступ к проточному цитометру ImageStream X ® для визуализации, а д-р Брайан Холл оказал неоценимую поддержку в работе с прибором и анализе данных. Техническую поддержку оказали Елена Билявская, Ханна Миллер и Карли Фэрбенкс, стажеры программы студенческих исследовательских стажировок Министерства энергетики США. Никола Толич и Сэм Пурвин оказали поддержку в обработке данных MS. Доктор Валери Куллинан поддержала статистический анализ.Часть исследований была проведена в Лаборатории молекулярных наук об окружающей среде W. R. Wiley, национальном научном учреждении, спонсируемом Управлением биологических и экологических исследований Министерства энергетики и находящемся в Тихоокеанской северо-западной национальной лаборатории (PNNL).
Вклад авторов
Задумал и спроектировал эксперименты: KEM GR. Проведены эксперименты: KEM EWR SMH. Проанализированы данные: KEM EWR SMH LPT GR. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: KEM EWR LPT GR.Написал статью: КЕМ ГР. Рецензировано и отредактировано рукопись: EWR LPT.
Ссылки
- 1. Чен Дж., Думамидис Х., Лайонс К., Мердей Дж., Роко М.С. (2007) Производство в наномасштабе. Отчет семинара Национальной инициативы в области нанотехнологий.
- 2. Гордон Р., Паркинсон Дж. (2005) Возможные роли диатомов в нанотехнологиях. Журнал нанонауки и нанотехнологий 5: 35–40.
- 3. Чанг Ч., Ван В., Гуцу Т., Гейл Д.К., Цзяо Дж. И др.(2009) Самосборка наноструктурированных диатомовых микрооболочек в узорчатые массивы с помощью многослойного осаждения полиэлектролита и струйной печати. Журнал Американского химического общества 131: 4178.
- 4. Кент М.С., Муртон Дж.К., Сатия С., Кузьменко И., Симмонс Б.А. (2009) Образование нанокремнезема на липидных мембранах, индуцированное силлафиновыми пептидами. Отношения структура-свойство в биоминерализованных и биомиметических композитах 1187: 95–100.
- 5. Kröger N, Deutzmann R, Sumper M (1999) Поликатионные пептиды из биокремнезема диатомовых водорослей, которые направляют формирование наносферы кремнезема.Наука 286: 1129–1132.
- 6. Крегер Н., Сандхаге К.Х. (2010) От биомолекул диатомовых водорослей до биоинспирированных синтезов материалов на основе диоксида кремния и диоксида титана. Миссис Бюллетень 35: 122–126.
- 7. Sandhage KH, Bao ZH, Weatherspoon MR, Shian S, Cai Y и др. (2007) Химическое восстановление трехмерных микросборок кремнезема до микропористых кремниевых копий. Природа 446: 172–175.
- 8. Rorrer GL, Jeffryes C, Gutu T, Jiao J (2008) Метаболическая вставка наноструктурированного TiO 2 в узорчатый биокремнезем диатомовых Pinnularia sp с помощью двухэтапного процесса культивирования в биореакторе.Acs Nano 2: 2103–2112.
- 9. Rorrer GL, Jeffryes C, Gutu T, Jiao J (2008) Двухэтапный фотобиореакторный процесс для метаболического внедрения наноструктурированного германия в микроструктуру кремнезема диатомовых водорослей Pinnularia sp. Материаловедение и инженерия С-биомиметические и супрамолекулярные системы 28: 107–118.
- 10. Поульсен Н., Берн С., Испания Дж., Крегер Н. (2007) Иммобилизация фермента кремнеземом посредством генной инженерии диатомовых водорослей Thalassiosira pseudonana .Angewandte Chemie-International Edition 46: 1843–1846.
- 11. Поульсен Н., Чесли П.М., Крегер Н. (2006) Молекулярно-генетическая манипуляция диатомей Thalassiosira pseudonana (Bacillariophyceae). Journal of Phycology 42: 1059–1065.
- 12. Шеппард В., Шеффель А., Поулсен Н., Крегер Н. (2012) Иммобилизация мультимерных и окислительно-восстановительных ферментов живым диатомовым кремнеземом. Appl Environ Microbiol 78: 211–218.
- 13. Lager I, Fehr M, Frommer WB, Lalonde SW (2003) Разработка флуоресцентного наносенсора для рибозы.Febs Letters 553: 85–89.
- 14. Кэмпбелл Р. Э., Карлсон Х. Дж. (2009) Биосенсоры на основе генетически закодированных FRET для многопараметрической флуоресцентной визуализации. Текущее мнение в области биотехнологии 20: 19–27.
- 15. Newman RH, Fosbrink MD, Zhang J (2011) Генетически кодируемые флуоресцентные биосенсоры для отслеживания динамики сигналов в живых клетках. Химические обзоры 111: 3614–3666.
- 16. Нгуен А.В., Догерти П.С. (2005) Эволюционная оптимизация флуоресцентных белков для внутриклеточного FRET.Природная биотехнология 23: 355–360.
- 17. Mowbray SL, Cole LB (1992) Рентгеновская структура периплазматического рибозного рецептора на 1,7 Ангстрема из Escherichia coli . Журнал молекулярной биологии 225: 155–175.
- 18. Патвардхан С.В. (2011) Биомиметический и биоинспирированный диоксид кремния: последние разработки и применения. Химические коммуникации 47: 7567–7582.
- 19. Крегер Н., Поульсен Н. (2008) Диатомовые водоросли — от биогенеза клеточной стенки до нанотехнологий.Ежегодный обзор генетики 42: 83–107.
- 20. Luckarift HR, Johnson GR, Испания JC (2006) Ферментные реакторы с иммобилизованным кремнеземом; применение в исследованиях ингибирования холинэстеразы. Журнал хроматографии B-аналитические технологии в биомедицине и науках о жизни 843: 310–316.
- 21. Naik RR, Tomczak MM, Luckarift HR, Spain JC, Stone MO (2004) Улавливание ферментов и наночастиц с использованием биомиметически синтезированного диоксида кремния. Химические коммуникации 1684–1685.
- 22. Винеке Р., Бернекер А., Ридель Р., Сампер М., Стейнем С. и др. (2011) Осаждение кремнезема синтетическими силафиновыми пептидами. Органическая и биомолекулярная химия 9: 5482–5486.
- 23. Scheffel A, Poulsen N, Shian S, Kröger N (2011) Микрокольца с нанопаттерном белка из диатомовых водорослей, которые управляют морфогенезом кремнезема. Слушания Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки 108: 3175–3180.
- 24. Эриксон HP (2009) Размер и форма белковых молекул на нанометровом уровне, определяемом с помощью седиментации, гель-фильтрации и электронной микроскопии.Биологические процедуры онлайн 32–51.
- 25. Hildebrand M, York E, Kelz JI, Davis AK, Frigeri LG, et al. (2006) Наноразмерный контроль морфологии и трехмерной структуры кремнезема во время формирования клеточной стенки диатомовых водорослей. Журнал материаловедения 21: 2689–2698.
- 26. Losic D, Rosengarten G, Mitchell JG, Voelcker NH (2006) Архитектура пор диатомовых панцирей: потенциальные наноструктурированные мембраны для разделения молекул и частиц. Журнал нанонауки и нанотехнологий 6: 982–989.
- 27. Врилинг EG, Beelen TPM, van Santen RA, Gieskes WWC (2000) Наноразмерная однородность структуры пор в диатомовом кремнеземе: комбинированное исследование малоуглового и широкоугольного рассеяния рентгеновских лучей. Journal of Phycology 36: 146–159.
- 28. Li L, Jiang ZY, Wu H, Feng YN, Li J (2009) Биокремнезем, индуцированный протамином, как эффективный носитель для иммобилизации ферментов с высокой загрузкой и улучшенной стабильностью. Материаловедение и инженерия C-Материалы для биологических приложений 29: 2029–2035.
- 29. Марнер В.Д., Шейх А.С., Мюллер С.Дж., Кислинг Д.Д. (2009) Иммобилизация ферментов через аутоинкапсуляцию, опосредованную силлафином, в подложке из биокремнезема. Прогресс биотехнологии 25: 417–423.
- 30. Spain JC, Luckarift HR, Naik RR, Stone MO (2004) Иммобилизация ферментов в биомиметической подложке из диоксида кремния. Природная биотехнология 22: 211–213.
- 31. Шен Ю.Ф., Толик Н., Хиксон К.К., Пурвин С.О., Андерсон Г.А. и др. (2008) De novo секвенирование уникальных последовательностей тегов для обнаружения посттрансляционных модификаций белков.Аналитическая химия 80: 7742–7754.
Понимание ладов по отношению к корпусу и длине шкалы
Мы часто задаем вопрос, как длина ладов соотносится с количеством ладов на корпусе гитары, при этом распространенное заблуждение состоит в том, что короткая шкала означает 12 ладов на гитаре. боди-гитары, в то время как длинная шкала означает гитары с 14 ладами к корпусу. Чтобы прояснить ситуацию, специалист по акустике Sound Pure Барретт Брукс в этом коротком видео рассказывает о разнице между длиной звукоряда и «ладами на теле».
Длина шкалы гитары — это, в просторечии, расстояние от гайки до седла, а точнее расстояние от гайки до 12-го лада, умноженное на два (не пропустите наш пост об измерении длины шкалы если вам нужно сделать это измерение на своей гитаре). Когда люди говорят о короткой шкале, это обычно 24 3/4 дюйма, в то время как длинная шкала превышает 25 дюймов. Большая длина шкалы означает большее натяжение струн, поскольку они должны охватывать большее расстояние.
Так как гитары с короткой гаммой имеют меньшее натяжение струны, у них немного больше места для маневра и мощности. Гитары с маленьким корпусом, как правило, имеют небольшой размер, включая то, что мы называем гитарами в стиле блюза, в которые вы действительно можете погрузиться, чтобы получить ударный звук. Они, как правило, более удобны, так как ваши пальцы будут бороться с меньшим напряжением по сравнению с длинной шкалой. И наоборот, из-за большего натяжения струн длинные гитары иногда могут больше поддаваться игре на флейтах (хотя и не всегда).Преимущество по сравнению с гитарой с короткой гаммой состоит в том, что вы получаете большую артикуляцию, разделение между нотами и громкость, особенно если вы играете. (Гитары с короткой гаммой иногда производят слишком много шума струн, если вы действительно в них кладете.)
Но каково отношение длины лада к телу? Вместо того, чтобы думать о 12- или 14-ладах как об измерении длины, думайте об этом больше как о разнице в том, где гриф встречается с телом, где находится отверстие для звука, где находится мост и где находится распорка.Вы абсолютно можете иметь длинную гитару на 12 ладов! Кроме того, положение 12 ладов на любой гитаре является точной серединой длины шкалы. И наоборот, у вас может быть 14-ладовая гитара с короткой гаммой.
Важно то, что на 12-ладовой гитаре бридж, крепления и звуковое отверстие находятся в разных местах, чем на 14-ладовой гитаре, и что 12-ладовая гитара потеряет немного ясности и баланса, но даст вам гораздо более басовитый, полный звук. Напротив, гитара с 14 ладами будет иметь большую артикуляцию и баланс от низких до высоких частот.Поскольку это похоже на различие между гитарой короткой и длинной гаммы, их часто путают!
Чтобы понять суть, Барретт рассматривает примеры гитар с различными комбинациями лада и длины лада, а также характеристики каждой из них, чтобы вы могли получить представление о взаимодействии между ними. Некоторые из рассмотренных примеров — гитары с короткой гаммой на 14 ладов, такие как Collings CJ35, гитары с длинной шкалой на 14 ладов, такие как Santa Cruz Pre-War OM, и гитары с короткой шкалой на 12 ладов, такие как Collings 001. и 12-ладовая шкала, такая как Santa Cruz D12 — все они обладают уникальными характеристиками благодаря своим размерам и конструкции.Как всегда, обращайтесь к нам с вопросами о конкретных моделях, которые вы можете рассмотреть, и о том, как древесина, стиль корпуса и другие варианты сборки влияют на их игровые возможности и тон. Мы поможем вам выбрать идеальный инструмент для вашего стиля игры и комфорта!
Anderson Guitarworks
Подробная информация (для технически подкованных):
Ровный конус: наш самый популярный профиль грифа для наших гитар с длиной шкалы 25 1/2 дюйма.Обтекаемый и быстрый силуэт с небольшим изменением глубины от гайки до 12 лада. Когда ваша рука скользит к верхним ладам, ощущение игры и глубина остаются примерно такими же.
Гайка с ровным конусом предлагается с двумя гайками:
Размеры ровного конуса: Наш обычный конус с ровным конусом — это тонкая и быстрая гайка. Если вы предпочитаете более крупную (более глубокую) форму шеи на спине, мы предлагаем силуэт Even Taper с увеличенной глубиной на +.030, +.050, +.070 или +100 дюйма. А если вы хотите стать стройнее, обратите внимание на наш ровный конус -.020.
Характеристики четного конуса:
Четный конус : 0,810 на первом ладу до 0,870 на 12-м
+,030 Четный конус : 0,840 на первый лад до .900 на 12-м
+.050 Even-Taper : .860 на первом ладу до .920 на 12-м
+.070 Even-Taper :.880 на первом ладу до .940 на 12-м
+ .100 Even-Taper : .910 на первом ладу до .970 на 12-м
-.020 Even-Taper :. 790 на первом ладу до 0,850 на 12-м
Happy Medium: Наш самый популярный гриф Cobra, Bobcat и Atom — это спинка средней глубины для: «не слишком большая и не слишком маленькая, а просто «правильное» ощущение шеи. Конус — это «золотая середина» среди других форм шеи.По мере того, как ваша рука скользит к верхним ладам, глубина игры увеличивается на желаемую «среднюю» величину.
Happy Medium предлагается в двух вариантах ширины порожка:
Happy Medium Размеры: Наша обычная Happy Medium — это тонкая / средняя гриф. Если вы предпочитаете более крупную (более глубокую) форму шеи на спине, мы предлагаем тот же силуэт Happy Medium, увеличенный по глубине на +030 или +050 дюйма.
Happy Medium Характеристики:
Happy Medium :.825 на 1-м ладу до 0,915 на 12-м
+.030 Happy Medium : 0,855 дюйма на первом ладу до 0,945 на 12-м ладу
+ 050 Happy Medium : 0,875 дюйма на первом ладу до 0,965 дюйма на 12 ладу
60-е Vibe: Определяющий характер грифа 60-х годов Vibe — это увеличение глубины по мере того, как ваша рука перемещается с 1-го на 12-й лад. С конусом в стиле начала 60-х он считается грифом средней глубины на первых нескольких ладах и становится значительным грифом, когда вы берете горсть в верхние области грифа.
Модель 60’s Vibe предлагается с двумя гайками ширины:
Характеристики Vibe 60’s:
60’s Vibe: 0,835 дюйма на первом ладу до 0,960 дюйма на 12 ладу
+.020 Vibe 60-х: 0,855 дюйма на первом ладу до 0,980 дюйма на 12-м ладу *
-.020 Vibe 60-х: (ласково известный как 62 Pete ):. От 815 дюймов на первом ладу до 0,940 на 12-м ладу
50-е V: характеризуется V-образной спинкой в стиле 50-х.Если вам нравятся «V-образные шеи», они вам понравятся. Когда ваша рука скользит к верхним ладам, ощущение игры и глубина остаются примерно такими же, но V’ed.
Acoustic Bronze: Наш гриф Crowdster, гладкий, тонкий / средней глубины гриф для прекрасного ощущения акустической гитары, которое играет как теплое масло — даже на высоких ладах.
Acoustic Bronze предлагается с шириной одного порожка для удобного размещения пальцев с немного большими акустическими струнами:
Acoustic Bronze Specs: .820 на 1-м ладу до 0,890 на 12-м
CGSB 155.20 CSA Z462 12,7 кал / см2 NFPA 70E и ASTM F1506 40L HRC 2 NFPA 2112 Walls Royal Blue 9 унций FR 88/12 Полосатый комбинезон ATPV
CGSB 155.20 CSA Z462 12,7 кал / см2 NFPA 70E и ASTM F1506 40L HRC 2 NFPA 2112 Walls Royal Blue 9 унций FR 88/12 полосатый комбинезон ATPV
Walls Royal Blue 9 унций FR 88/12 полосатый комбинезон, HRC 2, ATPV, 12,7 кал / см2, CGSB 155.20, CSA Z462, NFPA 2112, NFPA 70E и ASTM F1506 40L: Инструменты и товары для дома.Комбинезон Walls Royal Blue 9 унций FR 88/12 в полоску, HRC 2, ATPV, 12,7 кал / см2, CGSB 155.20, CSA Z462, NFPA 2112, NFPA 70E и ASTM F1506 40L: Инструменты и товары для дома. Комбинезон FR в полоску CSA。 HRC 2, ATPV 12,7 кал / см2。 3M Scotchlite 9740 Промышленная стирка FR Отделка。 CGSB 155.20 (ткань, сертифицированная UL), CGSB 155.22, CSA Z462, NFPA 2112 (ткань, сертифицированная UL), NFPA 70E, ASTM F1506, и ткань OSHA 1910.269。 9 унций (88 процентов хлопка / 12 процентов высокопрочного нейлона), светоотражающие полосы с огнеупорной отделкой 3M Scotchlite 9740 (2 дюйма, желтый / серебристый / желтый), CAN / CSA Z9, класс 1 Конфигурация с полосками FR, Двусторонняя передняя молния с штормовым клапаном, Туннельный воротник с застежкой на липучке, Два передних верхних кармана со скрытой кнопкой, Два нижних передних накладных кармана с боковыми отверстиями для доступа, Два больших задних кармана, один с застежкой-молнией, Один карман для инструментов на задней правой ноге, эластичный пояс, двойная качающаяся спинка для удобства передвижения, весь металл термически защищен от кожи, размеры: 34-8 стандартный и 38-8 высокий, произведено на производстве, сертифицированном UL по стандарту ISO 9001 Средство.。。。
CGSB 155.20 CSA Z462 12,7 кал / см2 NFPA 70E и ASTM F1506 40L HRC 2 NFPA 2112 Walls Royal Blue 9 унций FR 88/12 Полосатый комбинезон ATPV
YAGMGUS Насадка для душа Хромированная насадка для душа с дождевой насадкой из нержавеющей стали Квадратный цвет Изменение цвета Насадка для душа Цвет потока воды: Серебро, Размер: 8 дюймов, хром. Белый набор из 4 предметов мебели Размер 1-1 / 4 FORMUFIT F1145WC-WH-4 5-позиционный крестообразный ПВХ-фитинг, 3 полосы Белый 17201-ES Command Изображение Подвесные полоски Medium, Enesco Trail разукрашенных пони Праздничные палочки из перечной мяты Фигурка Многоцветная 7.75 дюймов, C&F Home Mermaid Princess крапчатая бронза 28,75 x 4,75 дюйма Металлическое декоративное морское украшение из чугуна для полотенец в морском стиле. Prettyia Rosewood Carpenter Woodworking Woodcraft Plane Edge Polish Деревянная выпуклость Ручной строгальный инструмент для полировки 115x25x30 мм, 250V 10A Электрическая панель с винтовой крышкой Держатель предохранителя для 6 шт.